Juno MacGuff
Juno MacGuff es la protagonista de la película. Es una joven franca e ingeniosa de dieciséis años con una clara vena rebelde. Puede parecer abrasiva debido a su sarcasmo, pero también puede ser bastante encantadora y su ingenio sardónico suele ser lúcido y refrescante. Su exterior brusco y marimacho oculta un lado emocional y sensible que mantiene oculto, ya que puede sentirse abrumada fácilmente por las emociones.
También es propensa a tomar decisiones precipitadas sin pensar en las consecuencias de sus acciones. Cuando decide impulsivamente tener relaciones sexuales con Paulie Bleeker y su amigo de la infancia desde hace mucho tiempo, Juno termina embarazada. Inicialmente considera tener un aborto, pero pronto cambia de opinión y decide quedarse con su hijo, pero en su lugar, darlo en adopción. La película narra la montaña rusa emocional de un embarazo de 9 meses, que termina siendo un viaje de autodescubrimiento
Paulie
El padre del hijo de Juno, así como el mejor amigo y admirador de Juno desde hace mucho tiempo, Paulie es un alma sensible, gentil, genuinamente cariñosa, pero tímida. Al igual que Juno, él también es una persona profundamente emocional, pero a diferencia de Juno franco y obstinado, Paulie es callado e introspectivo, y a menudo se guarda para sí mismo mientras ordena sus emociones.
Al descubrir que Juno está embarazada, se retira con miedo y confusión. Más tarde, él se presenta a su embarazo y está a su lado después de que ella da a luz. Su único vicio son los Tic-Tacs naranjas.
Vanessa
La futura madre adoptiva que Juno ha seleccionado para su hijo por nacer. Vanessa es la esposa de Mark Loring, un músico de rock frustrado y actual compositor de jingle publicitarios.
Se la retrata como un tipo yuppie dominante, ambicioso en general, que tiene prioridades claras y altos estándares. Después de haber pasado por muchos años de decepción tratando de tener un hijo, Vanessa está ansiosa por tener un bebé y ser madre. La personalidad tipo A de Vanessa y la planificación obsesiva del bebé abren una brecha en su relación con Mark, que finalmente culmina en su divorcio. A pesar del divorcio, Juno todavía le da a su bebé a Vanessa para que lo críe por su cuenta.
El esposo de Vanessa y el futuro padre adoptivo del hijo de Juno, le gusta el punk rock ruidoso y las películas de terror que Juno también comparte. Mark trabaja desde su casa creando jingles comerciales, pero anhela secretamente sus días de gloria como músico de rock. De hecho, tiene una habitación que Vanessa ha designado como una especie de santuario a su pasado, adornada con recuerdos e instrumentos musicales. En la superficie, Mark proyecta un personaje fresco y relajado, el polo opuesto de su tensa esposa, pero después de conocer mejor a Juno, la fachada de lo cool se desvanece para revelar sus impulsos menos maduros de permanecer en su pasado punk rock. De hecho, lo último que quiere ser es padre, e incluso insinúa que quiere empezar una aventura con la menor de edad Juno, lo que la perturba enormemente. Mark es simpático y encantador, pero sufre de un complejo de Peter Pan y es deshonesto con su esposa acerca de sus deseos.
Mark Loring
El padre de Juno es un hombre de mediana edad, calvo y con bigote que puede parecer intimidante debido a su comportamiento brusco, su ingenio sarcástico y rápido y su actitud trabajadora y sensata. Sin embargo, su exterior brusco es solo eso, un exterior brusco. Él muestra una tremenda moderación con Juno, especialmente una vez que ella revela que está embarazada y que Paulie Bleeker es el padre. Mac es genuinamente cálido con su hija y es honesto al decir que no tiene una respuesta clara para su situación, pero aconseja cuidado y moderación para cualquier decisión que ella decida tomar con respecto a su embarazo. El embarazo de su hija sirve para hacer crecer y profundizar la relación padre-hija y, a pesar de sus deficiencias en la relación con su ex esposa, intenta ofrecer a Juno buenos consejos para encontrar el amor duradero.
Liberty Bell
Segunda esposa de Mac, madrastra de Juno y madre biológica de la hermana menor de Juno, la curiosamente llamada Liberty Bell. Bren es el yin de Mac y el yang de Juno. Su relación con su hijastra es bastante cordial pero aún emocionalmente distante, más debido a la incomodidad de su composición familiar que a la falta de voluntad para conocerla. Sin embargo, todo esto cambia una vez que se conoce el embarazo de Juno. Bren es ferozmente cariñosa y protectora durante el embarazo de Juno, y las dificultades unen a la madrastra y la hijastra. Ella pasa a primer plano como la muy necesaria figura materna y el apoyo emocional de Juno a medida que avanza su embarazo. Bren es dueña de un salón de manicura y tiene una devoción por los perros.
Leah
El mejor amigo de Juno que la ayuda a buscar los anuncios de ayuda para encontrar una pareja adecuada para su hijo por nacer. Leah es una animadora y una chica popular, pero exhibe su parte justa de extravagancia a lo largo de la película. A ella le gustan los hombres mayores, lo que la ha llevado a tener coqueteos profundos (y tal vez un romance) con su profesor de geometría. Ella es leal a Juno y la ayuda a superar el embarazo con una sonrisa en su rostro.
La madre de Paulie, que no aprueba a Juno, debido a su comportamiento extravagante y punk y, finalmente, debido a su embarazo. Juno y Paulie nunca le dicen que Paulie es el padre, y Juno mantiene un desagrado irreverente por la Sra. Bleeker, caracterizándola como «un Hobbit … ya sabes, el gordo, que estaba en los Goonies».
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